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ecL化學發光液 EZECLplus化學發光液(增強型)用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關聯的抗原。由于采用了獨特的發光底物系統,可使用更高的抗體稀釋倍數(1:2000~1:10000),極其節省抗體,可檢測低于皮克級的蛋白,操作步驟無需進行特別優化。靈敏度高,信號持續時間長達5小時,不但適用于X射線膠片、也可用CCD或激光成像儀成像。 使用方法 1.執行常規SDS-PAGE、轉膜、洗膜。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。 【注】:推薦將一抗濃度稀釋到0.5μg/mL(0.05~1μg/mL均可),將二抗濃度稀釋到0.02μg/mL(0.005~0.04μg/mL均可)。 2.后1次洗膜的同時,新鮮配制發光工作液,根據用量將兩種組份按1:1比例混合均勻,備用。 【注】:(1)短時間暴露于日光燈下不會損害該工作液,但為獲得合適結果,將此工作液保存在棕色瓶中,避免暴露于任何強光。(2)取A液和B液一定要用不同的槍頭,工作液現配現用,室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。 3.用平頭鑷取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液(勿使膜完全干燥)。用移液器將工作液加到膜上(推薦1cm2膜加150μL發光液),使之充分接觸。室溫孵育5min,準備立即壓片曝光。 4.用平頭鑷子夾起膜,膜的下緣輕輕接觸吸水紙,去除膜上多余的液體,留下少量工作液,不可使膜完全干燥。 5.在X光膠片暗盒內表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將印跡膜貼在保鮮膜上,將保鮮膜折起來完全包裹印跡膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發光工作液。用膠帶將覆蓋印跡膜的保鮮膜固定在暗盒內,蛋白帶面向上。 6.在黑暗中將X感光膠片放置在包裹的保鮮膜上,根據蛋白濃度曝光適當時間(根據光強度需摸索曝光時間,一般30s-2min),顯影沖洗。 【注】:根據經驗,如果背景過高,可使用兩張X感光膠片同時壓片。 https:// *域名隱藏* /st325538/erlist_ *域名隱藏* https:// *域名隱藏* /st325538/product_ *域名隱藏*
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日期: |
2022-05-19 |
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